在干細胞療法及藥物發(fā)現(xiàn)等研究領(lǐng)域，三維(3D)細胞培養(yǎng)越來受到人們的關(guān)注。然而，3D細胞培養(yǎng)的準備工作可能很困難，并且移液技術(shù)不良可能導(dǎo)致在3D細胞培養(yǎng)實驗中產(chǎn)生巨大差異。Picus® Nxt移液器能夠使樣品制備的工作流程標準化并消除因個人移液操作導(dǎo)致的潛在負面影響，是水凝膠制備的理想選擇。

移液技術(shù)不良會導(dǎo)致樣品和實驗間的重復(fù)性低。制備過程中所使用的水凝膠、移液器及吸頭會使3D細胞培養(yǎng)物的制備具有挑戰(zhàn)性，并且容易產(chǎn)生差異，但重要的影響因素是個人的移液操作。通過使用電動移液器，您可以用預(yù)設(shè)好移液速度和混合步驟的方案，盡可能減少因個體移液操作引入的差異。

材料和方法

細胞混合物制備

使用Picus® Nxt賽多利斯電動移液器、賽多利斯Safetyspace™濾芯吸頭、賽多利斯Optifit吸頭、GrowDex®水凝膠混合制備細胞混合物。

GrowDex®定量

通過熒光增白劑染色法對GrowDex®進行定量。

活細胞定量

使用基于甲臜的檢測方法對細胞培養(yǎng)中的活細胞進行定量。

結(jié)果

充分混合可以改善 3D 細胞培養(yǎng)的結(jié)果

當使用Picus® Nxt移液器以中等混合速度（速度5）混合30 - 40次（圖 1）來制備并移取 GrowDex®混合物時，3D 細胞培養(yǎng)重復(fù)操作之間的變異系數(shù)（CV%）低。按照該工作流程，當移取 100 μL 至 96 孔板時，CV< 3%。

另一方面，不細心的混合操作可能會產(chǎn)生氣泡和泡沫，從而導(dǎo)致細胞數(shù)量變化增大，且細胞活力降低（圖2）。同樣地，混合操作不嚴謹也會導(dǎo)致終樣品中水凝膠含量出現(xiàn)很大 差異（圖 3）。

推薦使用賽多利斯 Safetyspace™濾芯吸頭進行3D細胞培養(yǎng)的移液

建議在細胞培養(yǎng)應(yīng)用中使用賽多利斯Safetyspace™濾芯吸頭，因為濾芯能夠降低交叉污染的風(fēng)險。

使用單道Picus® Nxt 300 移液器將GrowDex®稀釋液移取到 384 孔板上，過程中采用帶孔板跟蹤功能的多次分液模式（10 × 30 μL），以防止移液到錯誤的孔中（圖 4）。使用同一個吸頭進行總共 176 次重復(fù)移取。將 Safetyspace™吸頭與低吸附Safetyspace™吸頭進行比較。作為參考，使用低吸附Safetyspace™吸頭移取 10% FBS-RPMI。